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KCTD10基因干扰RNA慢病毒载体的构建

作者:丰昀; 张敏; 彭文婷; 李映蓉; 杨倩; 蒋乐...糖尿病视网膜病变kctd10慢病毒载体干扰rna

摘要:目的:构建KCTD10干扰RNA慢病毒载体。方法:合成KCTD10干扰序列,构建GV248-KCTD10-RNAi慢病毒干扰载体,利用PCR与测序验证阳性克隆。将KCTD10 siRNA干扰病毒载体与质粒pHelper1.0和质粒pHelper2.0三个载体共同转染293T细胞,使细胞合成并分泌释放病毒颗粒。收集病毒颗粒并检测病毒滴度。结果:GV248-KCTD10-RNAi慢病毒载体成功被连接转化,测序结果与设计序列一致;共转后收获KCTD10 siRNA慢病毒颗粒,检测其滴度为5×10~8TU/mL。结论:成功包装了KCTD10 siRNA慢病毒颗粒,为后续进一步研究KCTD10基因在糖尿病视网膜病变中的作用奠定了基础。

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湖南师范大学学报·医学版

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