血管形成抑制剂Tumstatin在鼻咽癌中表达鉴定及基因克隆

作者：方唯意; 刘真; 杨慧龄; 周宏珍; 刘腾飞; ...肿瘤抑素鼻咽癌血管生成抑制因子

摘要：目的:检测Tumstatin基因在鼻咽癌发病过程中的表达变化及克隆其编码序列。方法:利用半定量RT-PCR方法检测Tumstatin在鼻咽癌组织、鼻咽癌细胞和正常鼻咽组织中的表达,比较它们之间的表达差异。设计含酶切位点的PCR引物,利用RT-PCR方法从相对正常鼻咽组织中获取Tumstatin蛋白编码序列,T/A克隆入pMD18载体中。利用PCR和酶切鉴定获得阳性重组子。重组子最后经测序证实。结果:与相对正常鼻咽组织相比,Tumstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失。RT-PCR法成功获得Tumstatin基因编码区全长cDNA序列。重组克隆质粒插入片段经DNA测序后与GenBank中Tumstatin基因相应序列比较,100%同源。结论:Tumstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失。采用T/A技术成功克隆鼻咽组织中Tumstatin基因,为下一步将Tumstatin亚克隆入真核表达载体pEGFP-N1,探索其在鼻咽癌生长和转移中的作用奠定了基础。

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