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HaCaT条件培养基联合全反式维甲酸诱导人脂肪干细胞向表皮细胞分化的初步研究

作者:林文韬; 刘晓雪; 刘勇; 陈俊杰; 岑瑛人脂肪干细胞表皮细胞全反式维甲酸hacat细胞

摘要:目的 探讨 HaCaT 条件培养基能否促进全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导人脂肪干细胞向表皮细胞的分化。 方法 体外分离培养脂肪干细胞,通过流式细胞术检测 CD34、CD45、CD73、CD90、CD105 蛋白的表达以及成脂成骨诱导分化鉴定脂肪干细胞。Transwell 小室构建气液界面培养模型,配制含 ATRA、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)的诱导培养基 A 以及含 50%HaCaT 上清液、ATRA、EGF、KGF 的诱导培养基 B。实验分 3 组,即诱导培养基 A 组、诱导培养基 B 组及常规培养未诱导组,气液界面诱导培养 12 d,流式细胞术检测诱导后细胞 CK14、15、16、19 广谱细胞角蛋白(pan cytokeratin,Pan-CK)的表达。免疫荧光法检测 CK14 的表达。 结果 脂肪干细胞成表皮诱导培养后,流式细胞术检测结果显示诱导组 B Pan-CK 表达率大于诱导组 A,两组均大于未诱导组[分别为(22.0±3.5)%、(11.9±2.7)%、(1.1±0.3)%,P〈0.01],免疫荧光法检测结果显示诱导组均具有 CK14 荧光表达,诱导组 B CK14 表达率大于诱导组 A[分别为(19.5±7.0)%、(10.8±5.7)%,P〈0.01],未诱导组未见 CK14 荧光表达。 结论 HaCaT 条件培养基可加强 ATRA 诱导人脂肪干细胞向表皮细胞的分化的能力。

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