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用噬菌体展示技术筛选喉癌细胞靶向肽的研究

作者:冯俊; 李丽; 杨洪斌; 刘世喜噬菌体展示喉癌细胞靶向性

摘要:目的筛选人源喉癌Hep-2细胞株特异结合的短肽,作为喉癌靶向治疗的载体。方法体外培养Hep-2细胞株作为靶细胞,人正常喉黏膜上皮细胞为吸附细胞;用噬菌体展示十二肽库进行3轮差减筛选,随机挑取10个噬菌体克隆进行测序;采用酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法鉴定噬菌体与Hep-2细胞的结合活性;通过免疫荧光鉴定喉癌细胞特异性结合肽(F2)噬菌体阳性克隆与喉癌细胞结合的特异性。结果经过3轮筛选后,噬菌体在靶细胞Hep-2上出现明显富集;ELISA分析鉴定显示5个阳性克隆能与Hep-2细胞特异结合,其中F2噬菌体克隆对喉癌细胞的结合靶向性明显高于对照细胞(P〈0.05);免疫荧光显色显示,F2能特异性地与喉癌细胞结合。结论利用噬菌体展示肽库技术,可以成功筛选到F2,其可能成为喉癌靶向治疗的载体。

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