作者:闫乃红; 陈清英; 曹桂群; 王玲; 张发强; ...内皮抑素腺病毒转染293细胞
摘要:目的:利用Adeasy 1系统,构建并鉴定人内皮抑素(hES)重组腺病毒.方法:从真核表达载体pEGFP-N1-ASP-hES中将ASP-hES扩增,亚克隆至pAdTrack CMV穿梭质粒中,与pAdEasy 1质粒在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组为腺病毒载体.线形化后转染293细胞进行包装扩增,利用AdEasy系统上的绿色荧光蛋白鉴定病毒表达.结果:重组腺病毒载体经PCR鉴定正确,病毒滴度为1×108PFU/ml.结论:成功构建了人内皮抑素重组腺病毒Ad-ASP-hES,为内皮抑素基因治疗新生血管的进一步研究奠定了基础.
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