作者:唐恭顺; 匡安仁; 马超; 黄蕤; 梁正路胰岛素受体噬菌体肽库亲和肽肿瘤细胞
摘要:目的:筛选胰岛素受体高亲和肽作为肝细胞癌潜在靶向载体.方法:用噬菌体随机环七肽库,与鼠肝胰岛素受体亲和、筛选与扩增.经过三个循环的筛选,测定阳性噬菌体与胰岛素受体的亲和力,测定亲和力高的阳性噬菌体克隆插入DNA序列,推断出与噬菌体外壳gⅢ蛋白融合的短肽氨基酸残基序列.分析亲和短肽结构特征,固相法选择性人工合成多肽配基TK1,测定多肽TK1与胰岛素受体的亲和力.结果:经过三轮筛选,选择12个阳性克隆测序,11个克隆插入短肽是TK(Cys Gln Ser Lys His Trp Arg His Cys),合成肽TK1(Cys Gln Ser Lys His Trp Arg His Cys Tyr)与胰岛素受体有较高亲和力,Kd值为4.31×108L/M.结论:噬菌体肽库筛选小鼠肝胰岛素受体获得了两种多肽配基,多肽TK1与胰岛素受体有较高亲和力,可望作为肝癌靶向多肽,值得进一步研究.
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