作者:宋毅; 刘兆雄; 黄光琦; 肖林gcv系统肺癌细胞杀伤效应丙氨基鸟苷旁观者效应
摘要:目的观察单纯疱疹病毒胸苷激酶基因HSV-TK/GCV系统对人肺癌细胞H446的体外杀伤作用.方法利用脂质体(lipofectin)将重组逆转录病毒载体pLXSN-TK导入包装细胞PA317,G418筛选至抗性克隆出现,收获病毒液.加入聚凝胺感染H446细胞,并筛选出含TK基因的H446细胞.观察GCV对H446和不同比例混合的H446、H446/TK的杀伤作用及旁观者效应.结果经电镜及PCR检测证实TK基因已导入PA317、H446细胞.H446/TK细胞对GCV的敏感性明显高于H446细胞;随着TK + 细胞比例的增加,存活率进一步减低,提示GCV不仅杀死TK + 细胞,也杀死混合培养的未转导TK基因的H446细胞,表明HSV-TK基因转导的H446细胞具有明显的旁观者效应.结论 HSV-TK/GCV系统赋予人肺癌细胞对GCV的高敏感性及旁观者效应.
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