作者：马改转 修建华 魏兰芳 姬广海 李凡胡萝卜软腐欧文氏菌特异性引物分子检测技术pcr
摘要：胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜亚种Erwinia carotovora subsp．carotovora（Ecc）是引起魔芋和马蹄莲软腐病的主要病原细菌．本研究根据细菌L-氨基酸渗透酶同源基因设计URP核苷酸序列特异性引物进行普通PCR、巢式PCR，同时采用细菌16S-23SrDNA间的ITS序列设计引物及TaqMan探针进行实时荧光PCR，对样品中存在的胡萝卜软腐欧文氏菌进行检测，并比较了3种检测方法的特异性和灵敏度．结果表明，应用实时荧光PCR方法检测样品，其中存在的胡萝卜软腐欧文氏菌的最低菌悬液浓度可达10cfu／mL；巢式PCR灵敏度也可检测到10cfu／mL；而用普通PCR最低可检测到10^3cfu／mL．用实时荧光PCR和巢式PCR方法检测病菌，其灵敏度都比常规PCR提高了100倍，且实时荧光PCR方法更快速、简便、安全、准确，不需PCR的后续处理．实时荧光PCR方法适用于种苗、种球等检测领域．
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