互隔交链孢酚致DNA聚合酶β基因突变的实验研究

作者：朱涵; 何炜; 赵国强; 王书春基因突变交链孢酚实验研究cdna序列克隆技术序列变化基因序列致癌作用氨基酸细胞组rna正常组后发现iie点突变测序位点

摘要：目的观察互隔交链孢酚对NIH/3T3细胞中DNA聚合酶β(DNApolβ)基因突变的影响,研究互隔交链孢酚致癌可能的机制.方法NIH/3T3细胞分为两组:①各正常细胞组;②AOH组,AOH浓度为8 μmol·L-1.用RT-PCR方法从细胞全RNA中扩增出DNA聚合酶β基因Cdna序列,应用T-A克隆技术,克隆至Pgem-Teasy载体后进行测序,分析序列变化.结果测序后发现正常组DNA聚合酶β基因序列无任何变化,AOH组中228位点发生T-C突变(导致39号氨基酸由Tyr变为His),319位点也有T-C突变(导致69号氨基酸由Iie变为Thr).结论AOH可导致NIH/3T3细胞中的DNA聚合酶β发生点突变,推测AOH的致癌作用可能与引发细胞中DNA聚合酶β基因突变有关.

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