作者:陈琼 李瑛 罗俊辉 杨阳 李军 孙林 肖力 ...去甲斑蝥素纤粘连蛋白
摘要:目的:观察去甲斑蝥素(NCTD)对高糖刺激的HK-2细胞外基质和TGF-β1表达的影响。方法:常规培养HK-2细胞,无血清DMEM培养基同步培养24h,细胞分为正常葡萄糖组(C,D-glucOSe5.5mmol/L)、甘露醇对照组(M,5.5mmol/LD—glucose+24.5mmol/Lmannitoll、高糖组(HG,30mmol/LD—glucosel、高糖+NCTD干预组(30mmol/LD-glucose+0.5~40mg/LNCTD)。台盼蓝排斥实验检测NCTD对高糖刺激的细胞毒性。MTT法检测NCTD对高糖刺激的细胞增殖的影响。收集培养6,24,48h后细胞总RNA及蛋白,用RT.PCR检测细胞FN,Col1V和TGF-β1mRNA的表达,采用Western印迹检测FN,ColIV和TGF-β1蛋白的表达。结果:不同浓度NCTD作用72h后,浓度超过5mg/L的NCTD对高糖环境下的HK.2细胞有明显的毒性。RT-PCR和Western印迹结果显示:30mmol/LD-葡萄糖可引起HK.2细胞FN,Col1V和TGF-β1mRNA及蛋白水平的升高(P〈0.05),而5mg/LNCTD可抑制高糖刺激的FN,ColIV和TGF-β1的表达(P〈O.05)。相同渗透浓度的D-甘露醇组对上述指标均无影响(P〉O.05)。结论:NCTD能下调HK-2细胞FN,ColIV及TGF-β1的表达。
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