作者：袁润余; 曾汉日; 苏娟; 黎薇; 莫艳玲; 陆...数字pcr肠道病毒属实时荧光定量pcr
摘要：目的建立一种肠道病毒通用型微滴式数字PCR(ddPCR)的定量检测方法,以实现肠道病毒的量化检测。方法利用肠道病毒标准品对ddPCR反应中的探针浓度、退火温度进行优化,并确定ddPCR的检测范围。利用已优化好的反应条件对28份临床样本进行病毒载量检测。结果本研究确定ddPCR的最佳探针浓度为0.4μmol/L,退火温度为51.0℃,核酸检测范围为3.02~3.59×10^6 copies/μL,检出限为3.02 copies/μL。ddPCR方法线性相关系数为0.993 8,呈良好的线性关系。结论本研究建立基于ddPCR肠道通用型的定量方法,可有效地对临床样本中不同血清型的肠道病毒临床样本进行拷贝数定量分析,为临床研究病毒载量的测定提供一种技术。
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