EPS8蛋白的表达、多克隆抗体制备及其亚细胞定位

作者：罗畅; 丁小凤; 孙一兵; 韩梅eps8表达抗eps8多抗亚细胞定位

摘要：EPS8（EGFR pathwaysub strate 8）是epidermal growth factor receptor（EGFR）重要的激酶活性底物之一,近年有研究表明其与神经胶质瘤密切相关.为了对该基因进行深入的功能研究,成功地将EPS8基因构建于原核表达载体pGEX-4T-2,转化BL21（DE3）获得融合表达产物,用GST-EPS8（-10-230aa）免疫新西兰大白兔获得兔抗EPS8多克隆抗体.采用Western Blot,用该抗体检测EPS8基因的真核表达产物,证明该抗体有较好的针对EPS8蛋白的专一性,可用于对EPS8的结构和功能研究.同时,用该抗体通过荧光免疫细胞对4种神经胶质瘤细胞系进行定位分析发现,EPS8蛋白主要分布于胶质瘤细胞的细胞质中.

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