作者：王燕萍; 曹俊剑; 刘海礁; 崔红烟草cdna克隆基因转导烟草花叶病
摘要：以美洲商陆（Phytolacca americana L.）为材料，利用RT-PCR方法克隆商陆抗病毒蛋白（PAP）的cDNA，并构建双元植物表达载体PBinARpap.用捕获该质粒的根癌农杆菌菌株LBA4404与烟草叶片外植体共培养，并在附加30 mg·L^-1Kan的MS＋0.1 mg·L^-1IAA＋1.5 mg·L^-1BA的培养基上诱导植株分化，再生芽在附加30 mg·L^-1Kan的MS培养基上生根，实现再生植株.Kan阳性植株经PCR-Sourthern检测筛选，得到PCR阳性植株，证明异源PAP基因在烟草基因组中的整合;经过RT-PCR检测，证明PAP基因在RNA转录水平上有表达;攻毒试验表明，转基因烟草植株对供试病毒TMV具有明显抗性.
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