作者：王泽霖; 王新卫; 刘守川; 陈少渠; 杨卫华免疫技术病毒检测鸡传染性支气管炎病毒硝酸纤维素膜胶体金标记spf鸡早期检测检测抗原现场应用iggibv体积比测量值b抗原尿囊液含毒量特异性实验室稀释斑点单抗鸡胚毒株羊
摘要：采用胶体金标记纯化的羊抗鼠IgG,建立了一种对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)进行检测的银加强金标免疫技术(SECGA).先将抗原点样于硝酸纤维素膜(NCM)中央,封闭后浸于40×稀释的 IBV单抗中作用10 min,洗涤后再浸于体积比为1:4稀释的金标羊抗鼠IgG溶液中作用1 h,银染10 min后观察,在膜上出现灰黑斑点的为阳性结果,反之,不出现斑点为阴性结果.SECGA对IB抗原最低测量值为0.703 ng·点-1(约2 μL),对含毒尿囊液的最低检测为102..9 EID50.结果表明,IBVM41毒株在鸡胚中繁殖时以36～54 h检测含毒量最高;SPF鸡感染3 d后可从气管粘液中检出病毒.SECGA检测抗原可用于IBV早期检测,具有群特异性,快速、敏感、简便,不需特殊设备,结果易判定等优点,尤适于基层实验室或现场应用.
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