人骨髓源性神经样细胞的形态及超微结构

作者：柴立辉; 程相树; 吴素霞; 陈宗德; 鄢文海...人骨髓间充质干细胞神经细胞尼氏体超微结构

摘要：目的：探讨人骨髓间充质干细胞（Bone Mesenchymal Stem Cells，BMSC）分化形成的神经样细胞的形态及结构特征。方法：采用密度梯度离心法和贴壁培养的方法分离纯化人BMSC，流式细胞仪检测CD34、CD45、CD44等细胞表面抗原在BMSC上的表达。联合应用碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）、表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）、二甲基亚枫（dimethyl sulphoxide，DMSO）和丁羟基茴香醚（butyl hydroxy anisol，BHA）诱导人BMSC向神经细胞分化。光学显微镜下观察细胞的形态变化；甲苯胺蓝染色法对分化后细胞进行尼氏体染色；透射电子显微镜观察分化后细胞的超微结构特点。结果：分离纯化的人BMSC经流式细胞仪检测显示间充质干细胞相对特异性抗原CD44表达阳性，造血干细胞特异性抗原CD34、CD45表达阴性；加入诱导培养基培养2周后，细胞胞体变圆，折光性增强，有突起形成；甲苯胺蓝染色法显示分化后的细胞尼氏体染色阳性；透射电镜下细胞胞浆中有大量密集的呈扁平囊状的粗面内质网及其间的一些游离核糖体和多聚核糖体所组成的尼氏体的超微结构，并有神经微丝的形成。结论：EGF／bFGF／DMSO／BHA诱导人BMSC分化形成的神经样细胞能够表达成熟神经细胞典型的形态及超微结构特征。

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