作者:张雪萍; 米丽开姆·托合提尼亚孜; 李庆辉;...山羊痘病毒orf037克隆核心蛋白原核表达载体蛋白表达
摘要:山羊痘是由山羊痘病毒引起羊的一种急性、热性、接触性传染病。山羊痘病毒推测的核心蛋白(ORF037)是其结构蛋白之一。为了研究ORF037基因的生物学特性,试验采用PCR技术扩增出NJ-2010株的ORF037基因,将其插入pET42b载体构建原核表达载体,对经酶切鉴定的阳性重组质粒进行测序和序列分析,并转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导表达蛋白质,表达产物经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析。结果表明:PCR扩增出了ORF037基因,并构建了pET42b-037原核表达载体,测序分析表明其大小为393 bp,与参考株Peller株的相似度为99.35%,NJ-2010株与山羊痘毒株在同一个分枝上,大肠杆菌中表达的蛋白质分子质量约15 ku,与预期结果大小相符。说明NJ-2010株与山羊痘毒的亲缘关系最近,且可以在大肠杆菌中表达。
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