作者:牟彦双; 王丹; 王宇祥; 李辉鸡载体构建抗体血清
摘要:为了研究类胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)基因在鸡脂肪细胞代谢中的功能,试验构建鸡IGFBP2基因的原核表达载体并制备鸡IGFBP2基因的多克隆抗体,采用RT—PCR的方法扩增鸡IGFBP2基因的cDN段并将其插入到原核表达载体pGEX-4T-1中,利用IPTG诱导重组原核表达载体pGEX一4T-1/IGFBP2在大肠杆茵BL21中表达融合蛋白,利用谷胱甘肽Sepharose4B层析柱对融合蛋白进行纯化,免疫家兔,利用ELISA和Western—blot方法对抗体血清的效价进行检测。结果表明:试验免疫家兔获得了效价较高的鸡IGFBP2基因抗体血清。
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