作者:王冉; 曹鑫涛; 王国泽; 宁巧; 李王大; 曾...鸭茅正交设计体系优化
摘要:为了为鸭茅分子标记辅助育种提供理论依据,研究采用L16(4^5)正交试验设计,对相关序列扩增多态性(SRAP)-PCR反应体系中的4种主要参数(TaqDNA聚合酶、Mg^2+、dNTP、引物)进行了分析。结果表明:建立的鸭茅SRAP—PCR最佳反应体系为TaqDNA聚合酶1.0U、Mg^2+1.5mmol/L、dNTP250μmol/L、引物0.4μmol/L,总体积为25μL。最佳PCR循环条件为94℃预变性5min;94℃变性1min,35℃复性1min,72℃延伸1min,共5个循环;94℃变性1min,52℃复性1min,72clC延伸1min,共35个循环;最后72℃延伸10min;4℃保存。
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