作者:邹伶威; 李柱刚; 韩俊岩; 王珣美洲南瓜优化体系引物筛选
摘要:应用单因素实验和L16(4^4)正交设计对影响美洲南瓜SSR—PCR的主要参数进行优化,建立适合美洲南瓜SSR—PCR反应的最佳体系。结果表明,不同水平的各因素对PCR反应结果均有影响,优化后美洲南瓜SSR—PCR反应体系(20μL)为:1.00μmol·L-1引物、0.150mmol·L-1。dNTP、0.9UTaq酶、50ngDNA模板。运用优化后的反应体系对美洲南瓜进行多态性引物的筛选,ZL300对引物中筛选出68对扩增条带清晰、多态性丰富的SSR引物。
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