牛坏死杆菌43K OMP多克隆抗体的制备

作者：贺显晶; 王志慧; 张爱辉; 蒋剑成; 张思瑶...坏死杆菌43komp原核表达

摘要：为了评价牛坏死杆菌外膜蛋白43K OMP 的免疫原性,试验利用大肠杆菌原核表达系统对牛坏死杆菌43K OMP基因进行表达,纯化目的蛋白免疫兔,制备牛坏死杆菌43K OMP多克隆抗体,并对其进行鉴定。对基因序列进行预测分析后,针对大肠杆菌稀有密码子优化合成该基因序列,克隆至pET-32a 原核表达载体上,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达及镍柱进行纯化,获得重组蛋白大小约为59 ku。重组蛋白经Western blotting 鉴定后免疫兔,制备多克隆抗体。Western blot 检测牛坏死杆菌43K OMP多克隆抗体与43K OMP重组蛋白具有很好的免疫原性。研究成功制备了牛坏死杆菌43K OMP 多克隆抗体,为以43K OMP蛋白为基础的疫苗研究奠定基础。

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