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BRSV和BPIV-3双重PCR检测方法的建立及初步应用

作者:王嵩 林红丽 王宇鹏 刘振格 王杰 杨明发 ...牛呼吸道合胞体病毒牛副流感病毒3型双重反转录聚合酶链反应

摘要:为建立一种快速诊断牛呼吸道合胞体病毒(BRSV),牛副流感病毒3型(BPIV-3)病毒病的方法,根据Genbank中登录的BRSV核衣壳蛋白N基因序列和BPIV-3的核衣壳蛋白N基因序列,利用分子生物学软件Primer5.0设计2对特异引物,经过条件优化,建立了BRSV和BPIV-3的双重PCR检测方法。采用该方法检测BRSV和BPIV-3参考毒株,特异性良好。对参考毒株进行梯度稀释检测,结果该方法检测BRSV的敏感性可达10 TCID50·100μL^-1,BPIV-3可达10 TCID50·100μL^-1。应用建立的双重PCR方法能够从临床样品中检测出BRSV和BPIV-3。表明建立的双重PCR方法具有特异、敏感、快速的特点,可用于BRSV和BPIV-3的临床检测。

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黑龙江八一农垦大学学报

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