作者：张丽青 姜红霞 闫艳春环境微生物学酯酶b1融合蛋白212程菌
摘要：目的提高酯酶B1融合蛋白的表达量，研究pThioHisA-B1／DH5α工程菌株的最优发酵条件。方法依次在不同的培养基（LB，SOB，YT，TB）、诱导时间（1—8h）、诱导剂浓度（0．3～1mmol／L）、诱导温度（25—37℃）等因素变化下，研究融合蛋白的表达量；目的产物经SDS-PAGE电泳和薄层凝胶扫描，以获得最佳表达条件。结果工程菌优化的发酵条件为，最适宜的培养基为TB，诱导剂IPTG的最佳浓度为0．4mmol／L,最佳诱导时间为6h，最佳诱导温度为28℃。工程菌在最佳条件下表达时，融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的40．3％，其中66．2％为可溶性蛋白。结论本实验筛选出了工程菌的最优化发酵条件，利用本实验的优化条件可获得高产量、可溶性的酯酶B1融合蛋白，为酯酶B1的进一步放大生产和实际应用奠定了基础。
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