作者:李湘鸣; 罗方妮; 陈春波; 陈秀云; 吴玉娟...环境污染物亲电性化学污染物虫荧光素酶转基因细胞
摘要:目的用亲电性反应元件(EPRE)调控的转虫荧光素酶基因细胞快速评价环境的污染程度。方法采用分子生物学的方法,将EPRE与TK基本启动子和编码虫荧光素酶(LUC)的基因相融合,构建成EPRE调控的LUC稳定表达载体,将其转染于HeLa细胞,经G418筛选出稳定的细胞株。该细胞经不同浓度的亚砷酸钠(NaAsO2)、氯化镉(CdCl2)、氯化汞(HgCl2)和顺丁烯乙酸二乙酯(DEM)作用后,用荧光素酶试剂盒物测LUC的表达量。结果DNA测序显示,EPRE调控的LUC稳定表达载体结构框架正确;LUC的表达量与受试物具有一定的剂量-效应关系,其中DEM的剂量-效应关系最明显。结论EPRE调控的转LUC基因细胞构建成功。
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