作者:谢娟; 刘方欣; 王颖; 李少林反义探针核磁共振光谱红外光谱
摘要:报道反义探针99Tcm-EC-ASODN的合成和标记.将次乙酰双半胱氨酸(L,L-ethylene dicysteine,EC)与反义寡脱氧核苷酸(Antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)进行偶联,形成复合物EC-ASODN,通过核磁共振图谱(1H-NMR)、红外图谱(IR)、紫外(A260)吸收和电泳,鉴定EC-ASODN复合物的结构.用锝(99Tcm)标记EC-ASODN,通过薄层层析评价99Tcm-EC-ASODN的标记率、放化纯和稳定性.结果显示,1H-NMR、IR谱图、紫外吸收和电泳都证实EC与ASODN联结形成EC-ASODN,99Tcm-EC-ASODN的标记率为77.28%,放化纯为97.52%,Rf=0.95-1,4 h内具有很好的稳定性.结论:EC与ASODN能形成稳定的复合物EC-ASODN,用99Tcm标记,方法简便,能得到标记率高和稳定性好的反义探针.
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