作者:谭宏涛; 孙学英; 许军; 潘尚哈; 姜洪池脾细胞凋亡wistar大鼠诱导改变临床应用流式细胞术培养基显著性差异高效
摘要:目的研究体外分离大鼠脾细胞并应用γ射线诱导脾细胞凋亡的实验方法.方法无菌条件下手术切除Wistar大鼠脾脏,制备脾细胞悬液,在RPMI 1640培养基(含10%小牛血清)中培养24~48h后,γ射线照射诱导脾细胞凋亡,通过细胞形态学观察、流式细胞术测定及DNA Ladder 测定检测大鼠脾细胞生物学改变及凋亡率.结果γ射线照射后,脾细胞出现形态学及分子生物学改变;通过流式细胞术测定辐射剂量分别为5 000rad和10 000rad的实验组脾细胞凋亡率分别为76.63%±3.53%和82.99%±2.04%,与对照组36.04%±2.98%相比较有显著性差异(P<0.005).结论体外条件下γ射线可以高效诱导大鼠脾细胞凋亡,为进一步体内研究凋亡脾细胞对机体免疫应答和临床应用奠定了基础.
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