作者：万丽丽; 王转茸; 辛强; 董发明; 洪登峰; ...napus双顺反子草甘膦抗性农达筛选标记
摘要：利用Genome walking方法在孟山都抗农达油菜（Brassica napus L.）中克隆了GOX-CP4EPSP双顺反子结构。利用农杆菌介导的遗传转化方法将PCAMBIA-GOX-CP4EPSP植物双元表达载体转化甘蓝型油菜Pol CMS恢复系＂7-5＂获得转基因植株。在田间对转基因植株喷施400倍的农达（41%草甘膦异丙胺盐）,所有的转基因家系都能存活,而非转基因Pol CMS恢复系＂7-5＂全部死亡。在转基因植株叶片中能够检测到GOX和CP4EPSP基因的表达。对转基因T1代3个家系在60 mg/L草甘膦培养基上的发芽试验以及GUS染色分析表明抗草甘膦的单株能表达与GOX-CP4EPSP共转化的GUS蛋白质,而对草甘膦敏感的单株和野生型对照植株都不能表达GUS蛋白质。鉴于GOX-CP4EPSP双顺反子在转基因油菜中的有效性和稳定性,可以作为双子叶植物遗传转化的筛选标记。
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