作者:田宇曦 刘晓艳 张志刚 杨自文cry1ac融合蛋白玉米螟活性比较
摘要:通过PCR技术将2种不同来源的苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis.简称Bt)cry1AC蛋白基因克隆到大肠杆菌pGEX-6P-1表达载体,并转化到宿主菌BL21,采用IPTG进行诱导表达,并用亲和层析法进行融合蛋白的纯化,纯化后的蛋白质进行玉米螟的室内生物测定试验。结果表明,来自Bt菌株NBIN-866的Cry1Ac蛋白杀玉米螟的LG50为665.39μg/mL,来自Bt菌株NBIC-380的Cry1Ac蛋白杀玉米螟的LG50为15.07μg/mL,后者具有更高的杀虫活性。氨基酸序列比对发现来自菌株NBIC-380的Cry1Ac氨基酸序列的71位和393位都为丝氨酸S,而NBIN-866的都为脯氨酸P,推测这两个位点的氨基酸的变化可能是影响毒性大小的重要因素。
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