作者:谷守芹; 王海祥; 范永山; 韩建民; 董金皋玉米两步扩增法玉米大斑病抗病相关基因
摘要:对一步扩增法和两步扩增法在DDRT-PCR中的扩增效率进行了比较,结果发现,两种方法得到的片段大小都在150~1500bp之间,但条带数量和清晰度不同.一步扩增法得到扩增条带为30~45条,条带较模糊,两步扩增法得到的扩增条带为40~60条,条带清晰.一步扩增法获得10条玉米抗大斑病差异表达条带,只有55条带中的cDNA能够成功回收并产生有效扩增,差异条带回收率53.9%,而两步扩增法获得了148条差异条带,其中138条带都能得到有效回收和扩增,回收率达93.2%.因此,步扩增法更有利于差异条带的回收和二次扩增.
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