作者：宋志成; 费新敏; 杨煜; 乔利仙; 王晶珊; ...马铃薯a病毒重组cp多克隆抗体酶标记抗体
摘要：利用重组CP作抗原制备出马铃薯A病毒的多克隆抗体,并将其用于DAS-ELISA检测。以p ET22b（＋）为起始载体,构建了PVA-CP基因的原核表达载体p ET22b-ACP,重组菌BL21（p ET22b-ACP）经IPTG诱导表达出了分子量为30 k Da的特异性重组CP。利用高纯度重组CP为抗原免疫家兔,制备出了效价为1∶512 k的抗血清。以PVA重组CP为抗原,用间接ELISA与直接ELISA分别测定重组CP纯化抗体（Ig G）及其碱性磷酸酶标记物（Ig G-AP）的活性,用DAS-ELISA测定2种抗体的活性,目测及OD值测定结果表明3种ELISA测定反应都呈阳性。以PVA病毒阳性标准物为抗原,在上述3种ELISA测定中也呈阳性反应,重组CP多克隆抗体及其酶标抗体与PVA有较强的反应信号。利用重组CP制备的多克隆抗体及其酶标抗体达到了马铃薯A病毒DAS-ELISA检测的要求。
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