作者：夏服宝; 涂文娟; 黄旺; 彭文明冬虫夏草内切酶限制性中酸性超螺旋dna单链dnadnase分离纯化hplc离子交换非特异性缓冲体系金属离子反应温度edta抑制作用菌丝体层析柱分子筛分子量醋酸铵rna
摘要：从冬虫夏草菌丝体中提取并纯化了一种酸性非限制性DNA内切酶,命名为CSDNase.CSDNase是通过(NH4)2SO4沉淀,Sephacryl S-100 HR分子筛层析柱,DEAE-Sepharose F.F离子交换和HPLC分离纯化得到的.在SDS-PAGE电泳中CSDNase分子量约为34 kDa.CSDNase对超螺旋DNA(质粒),双链DNA(λDNA),单链DNA(鲑鱼精DNA)都有非特异性的内切酶活性,但CSDNase不能消化RNA.CSDNase在pH5.5的醋酸铵缓冲体系中处于最大DNase活性,最适反应温度为55℃.CSDNase酶活不依赖于金属离子,EDTA不能抑制其酶活,但高浓度的金属离子对酶活有明显的抑制作用.
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