作者:王佳宁; 陈少云葡萄糖激酶克隆表达
摘要:目的:实现葡萄糖激酶GK的克隆表达。方法:通过酶切、酶连、转化构建重组质粒pCDFDuet-GK,进而构建工程菌;研究诱导温度、诱导时机、诱导强度、诱导时间对酶活力的影响,优化表达条件。结果:成功构建表达载体pCDFDuet-GK和工程菌,实现了葡萄糖激酶的克隆表达,在诱导温度16℃,诱导时机OD6000.6,诱导强度0.6mMIPTG,诱导时间12h的最优条件下,最大酶活力达到6.6U/L。
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