作者：陈相好; 蔡梦迪; 陈峥宏; 谷俊莹; 文学琴...艰难梭菌rsbwrsbv
摘要：目的:构建艰难梭菌rsbV(编码anti-anti-sigma因子)、rsbW(编码anti-sigma因子)及sigB基因(编码sigma-B因子)的CRISPR-Cas9敲除载体。方法:利用重叠延伸PCR技术分别扩增针对艰难梭菌rsbV、rsbW及sigB基因的gRNA序列及同源臂序列,并分别将其克隆到pJZ23载体上,采用菌落PCR结合DNA测序验证所构建的基因敲除载体。结果:扩增获得艰难梭菌rsbV、rsbW、sigB基因的gRNA序列及同源臂序列,菌落PCR及测序均表明成功构建了艰难梭菌rsbV、rsbW、sigB基因的敲除载体。结论:成功构建了艰难梭菌rsbV、rsbW、sigB基因CRISPR-Cas9敲除载体。
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