作者:张荣红; 廉芳; 周孟; 贾铁文; 何志旭; 刘...recq解旋酶单克隆抗体免疫荧光免疫组织化学染色肿瘤
摘要:目的:制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体(6H5抗体),鉴定其生物学特性并开展其对肿瘤细胞及肿瘤干细胞中RecQ解旋酶的检测。方法:在Balb/c小鼠腹腔接种杂交瘤细胞6H5后收集腹水,ELISA法鉴定腹水中6H5抗体,间接免疫荧光技术检测6H5抗体与乳腺癌细胞MDA-MB-435、人肾癌细胞GRC-1、人舌癌细胞Tca8113中BLM、RecQ4和RecQ5的结合;以6H5抗体作为一抗,免疫组织化学染色法分析Jurkat、MDA-MB-435肿瘤细胞及肿瘤干细胞中RecQ解旋酶的表达水平。结果:经鉴定,小鼠腹水中6H5抗体阳性,该抗体能识别不同肿瘤细胞株中的BLM、RecQ4和RecQ5解旋酶,还可敏锐检测Jurkat、MDA-MB-435肿瘤细胞与肿瘤干细胞中RecQ解旋酶的表达;RecQ解旋酶在Jurkat肿瘤干细胞中表达水平明显高于Jurkat肿瘤细胞,而在MDA-MB-435肿瘤干细胞表达水平则低于MDA-MB-435肿瘤细胞,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:RecQ家族解旋酶可以作为多种肿瘤细胞及肿瘤干细胞表面标志物的备选指标。
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