作者:余婧 赵杰宏 邹颉 付强 张孝廉自动化工作站烤后烟叶dna提取方法
摘要:为建立高效、快速、准确的烤后烟叶DNA提取方法,采用BioMek NXP自动化工作站与国产DNA磁珠法提取试剂盒相结合,建立了自动化批量提取烤后烟叶基因组DNA(作为PCR模板)的方法,以获取高质量的烤后烟叶DNA满足PCR检测需求。结果表明:水浴时间30min、样本量70-80mg、80%乙醇洗涤4次能获得OD260/OD280为1.7-1.9,浓度大于100ng/μL的烤后烟叶基因组DNA,合格率达95.8%。经PCR定性扩增烟草硝酸还原酶基因(NR),该方法所提的DNA溶液中无PCR反应抑制物残留,可直接用于PCR定性分析。烟叶粉末经预处理,取上清液上机后约110min可完成96份样品的DNA提取工作。
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