作者：唐婧 苏迪 袁帅 杨七 乙引喀斯特土壤纤维素酶
摘要：为从喀斯特土壤宏基因组DNA中筛选获得新型β-葡萄糖苷酶基因，采用β-葡萄糖苷酶活性筛选策略，从宏基因组文库中筛选β-葡萄糖苷酶基因，并对其进行初步酶学性质分析。结果表明：构建宏基因组文库中外源DNA总量约为5．4×10^7bp，平均插入片段约为2．7kb。筛选获得3个编号为pGLU001、pGLU-002和pGLU-003的表达β-葡萄糖苷酶活性的克隆。其外源片段分别包含有1383bp、1437bp和1227bp的ORF，分别编码460、478和408氨基酸组成的蛋白质，P1分别为5．12、4．78和8．78，蛋白质分子量分别为52.3KD、52．6KD和47.7KD。BLAST软件分析结果，pGLU-001和pGLU-002分别与来自Di-clyoglomus thermophilum和Bacillus subtilis TU-B-10的β-葡萄糖苷酶的氨基酸组成上有78．3％和66．7％的相似性，而pGLU-003经BLAST比对后未发现与目前报道的β-葡萄糖苷酶基因的核酸及氨基酸水平上有相似性，从而推测pGLU-003蛋白是来源于未培养微生物的新型β-葡萄糖苷酶。进一步酶学性质研究表明．3个8一葡萄糖苷酶最适温度分别约为30℃、40℃及50℃，最适PH分别约为6．0、9．0及10.0。Mg^2＋对3个酶有较强的促进作用，同时Zn^2＋对pGLU-001也有较强的促进作用，而EDTA和Fe^3＋对于3个酶都有不同程度的抑制作用。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
