作者：王伟; 陈雪; 钟兆铭; 储红映; 胡泽东; 程...甲状腺肿瘤rna小分子干扰质粒
摘要：目的：构建及测序鉴定重组质粒pSUPER-IL-11-shRNA，检测其对甲状腺未分化癌（ anaplastic thyroid carcinoma，ATC）细胞株sw579 IL-11基因的沉默效应。方法：根据Genebank中IL-11 cDNA序列，设计并合成3对两端有酶切位点的特异编码IL-11shRNA序列的寡核苷酸链，退火成互补双链后与pSUPER. retro. puro质粒载体连接，转至大肠杆菌DH-5α菌株，挑取单个抗性克隆，提取质粒进行1%琼脂糖凝胶电泳鉴定及测序分析，脂质体介导重组质粒转染ATC细胞株sw579，real-time PCR及ELISA检测其对靶基因IL-11的表达影响。结果：重组质粒pSUPER-IL-11-shRNA酶切产物凝胶电泳结果显示，3个样本均为阳性重组质粒，测序鉴定3种重组质粒pSUPER -IL-11-shRNA序列正确，转染3种重组质粒后sw579细胞裂解液中IL-11 mRNA和细胞培养上清液中IL-11蛋白显著降低。结论：本研究成功构建重组质粒pSUPER-IL-11-shRNA，为进一步探索IL-11在ATC进展中的作用奠定了基础。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
