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重组大肠杆菌表达绿色气球菌丙酮酸氧化酶的条件优化

作者:卢俊文; 张薷月; 何宣贝; 周紫薇; 吕嘉猛...丙酮酸氧化酶大肠杆菌发酵优化可溶性蛋白表达

摘要:本文优化了表达绿色气球菌丙酮酸氧化酶的重组大肠杆菌的诱导条件。优化了诱导温度、诱导剂IPTG浓度、诱导时重组大肠杆菌的浓度、溶氧等条件后发现最佳的诱导条件为25℃、IPTG 0.5 mmol/L、OD 600 0.5细胞浓度、250 mL摇瓶中50 mL发酵液。该条件下重组大肠杆菌诱导24 h后最终的丙酮酸氧化酶活力达到7 396.9 U/L,与优化前相比提高了4倍,是目前报道的最高水平。本研究结果为大肠杆菌大量表达有活性的丙酮酸氧化酶,以及丙酮酸氧化酶的生产应用奠定了基础。

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工业微生物

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