作者：孙亚范; 王海宽; 杜连祥; 路福平甲醇毕赤酵母重组子木质素过氧化物酶黄孢原毛平革菌电转化信号肽酶活测定表达酶基因缺陷型
摘要：将编码黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶(lip)的cDNA克隆到酵母整合型质粒pME-TA上,电转化Ade缺陷型甲醇毕赤酵母(Pichia methanolica)PMAD16,通过MD平板及PCR方法筛选和鉴定重组子.重组子发酵液经SDS-PAGE分析和木质素过氧化物酶活力测定等方法鉴定,表明带自身信号肽的黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因(lip)在甲醇毕赤酵母中得到表达.优化其发酵培养条件,以藜芦醇为底物进行酶活测定,其酶活可达932U/L.相应发酵指数为12.94U/h·L.比出发菌株提高了24.18%.
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