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‘宁杞8号’体细胞胚胎发生体系建立

作者:刘静; 袁婷; 倪细炉; 朱强; 王翠平体细胞胚胎发生体胚诱导增殖体胚萌发植株再生

摘要:以宁夏枸杞新品种‘宁杞8号’幼嫩叶片为外植体,探讨激素组合及添加物对‘宁杞8号’体细胞胚胎诱导、体胚增殖、萌发和植株再生的影响,并建立高效稳定的体细胞胚胎发生体系。结果表明:通过对6-BA、2,4-D和IAA进行正交分析,筛选出‘宁杞8号’体细胞胚诱导最优激素组合:6-BA 1.0 mg·L^-1+2,4-D 0.3 mg·L^-1+IAA 0.4 mg·L^-1,体胚诱导率达88.67%。极差分析比较各激素间的影响,6-BA对体胚诱导影响最显著。当高浓度的生长素及低浓度细胞分裂素浓度适宜的配比时,才能诱导产生形态正常数量多的‘宁杞8号’体细胞胚。在体胚增殖培养中,6-BA的浓度过高易导致玻璃化,不利于‘宁杞8号’体胚增殖生长。随着激素浓度的增高,体胚增殖倍数增加,玻璃化率也越高,综合分析得到‘宁杞8号’最佳体胚增殖培养基为6-BA 0.4 mg·L^-1+NAA 0.6 mg·L^-1。当添加IBA 0.3 mg·L^-1+GA 3 0.4 mg·L-1+蔗糖10 g·L^-1时,‘宁杞8号’体胚萌发率最高,萌发率达89.17%。添加GA 3及低浓度蔗糖能促进成熟的体胚萌发。对‘宁杞8号’体萌发的影响程度依次是IBA>蔗糖>GA 3。活性炭能有效提高‘宁杞8号’体胚再生植株率,同时对萌发体胚的根的发育也有促进作用,当IBA 0.1 mg·L^-1+KT 0.4 mg·L^-1+活性炭1 g·L^-1时,‘宁杞8号’体胚再生植株效果最佳,体胚再生率达91.67%。

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广西植物

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