作者：包曙光; 魏情情; 刘智康; 聂祥; 门淑珍拟南芥醛还原酶at3g04000表达模式过量表达
摘要：植物体内的α,β-不饱和活性醛类化合物对植物细胞具有毒害作用,清除这些α,β-不饱和活性醛类化合物对于植物细胞维持正常的生命活动至关重要。前人研究报道通过体外酶活测定和异源瞬时表达鉴定拟南芥At3g04000基因编码的蛋白为NADPH依赖的叶绿体醛还原酶（Arabidopsis NADPH-dependent chloroplastic aldehyde reductases,At Chl ADRs）,推测其在清除叶绿体中长链（≥5）α,β-不饱和醛类物质中具有重要的功能。该研究主要构建了拟南芥At3g04000基因的表达模式分析载体Pro At3g04000：GUS、亚细胞定位分析载体At3g04000-EGFP和过量表达载体At3g04000-OE,并获得了转基因拟南芥,并通过实时定量PCR分析了At3g04000基因在拟南芥不同组织中的转录水平。结果表明：拟南芥At3g04000基因在幼苗中的转录水平最高,在莲座叶、茎生叶、花序和角果中均有较高的转录水平;而在根部和茎秆中的转录水平较低。通过对Pro At3g04000：GUS转基因植株的GUS染色分析可知,At3g04000基因在子叶、莲座叶和萼片的维管组织和保卫细胞中均有较强的表达,在根的维管组织中有较弱的表达。通过共聚焦显微镜对At3g04000-EGFP转基因植株的观察和分析发现,At3g04000不是定位于叶绿体中,而是定位在细胞质和细胞核中。该研究结果为深入研究拟南芥醛还原酶编码基因At3g04000的功能奠定了基础。
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