作者：王天云; 袁保梅; 柴玉荣; 王建人; 薛乐勋核基质附着区杜氏盐藻分离特征性percolltritonpuc18破碎细胞25mm蛋白酶k乙醇沉淀mars体外结合序列特征分析结果dna限制酶细胞核水杨酸核蛋白sds抽提筛选克隆载体测序
摘要：采用0.5% Triton X-100破碎细胞,15% Percoll分离盐藻细胞核,25 mM二碘水杨酸锂(lithium diiodosalicylate,LIS)抽提核蛋白,限制酶消化除去结合松弛的DNA,蛋白酶K-SDS处理,酚/氯仿抽提,乙醇沉淀提取核基质附着DNA,限制酶酶切连至pUC18载体上构建MARs文库.随机挑选6个克隆进行体外结合实验筛选,筛选出一能与核基质结合的克隆,测序分析结果表明该序列具明显的MAR序列特征.
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