作者：肖青 邹小丽 谢理成脂多糖酶联免疫试验牛酪蛋白牛血清山羊血清
摘要：目的 改进脂多糖（LPS）酶联免疫试验（ELISA）法检测方法,提高ELISA法的灵敏度及特异性.方法 将不同浓度（0 mg/ml、0.01 mg/ml、0.1 mg/ml、1 mg/ml、10 mg/ml、100 mg/ml）LPS（100 μl）加样于预包被的ELISA板,筛选OD492较高的LPS浓度.按1 ∶2、1 ∶20、1 ∶50、1 ∶100、1 ∶200、1 ∶500稀释比例分别在每孔加入200 μl牛酪蛋白、牛血清、山羊血清,筛选OD492较低的封闭液稀释比例.用优化的LPS浓度和封闭液稀释比例,比较牛酪蛋白、牛血清、山羊血清检测LPS灵敏度及特异性,筛选出最佳封闭液.结果 LPS在0.1 mg/ml以上时OD492较高,牛酪蛋白、牛血清、山羊血清在1 ∶100稀释比例时获得的OD492较低.选择1 ∶100稀释比例作为封闭液优化稀释比例.按1 mg/ml LPS浓度,1 ∶100稀释比例,山羊血清OD492显著高于其他封闭液（P＜0.05）.按0 mg/ml LPS浓度,1 ∶100稀释比例,山羊血清OD492显著低于其他封闭液（P＜0.05）.结论 以1 ∶100稀释比例的山羊血清作为封闭液的ELISA法对LPS具有较好的灵敏度及特异性.
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