作者:余晶 鲍中英 徐玉敏 Boris Yofre表儿茶素huh7细胞细胞内活性氧
摘要:目的:探索表儿茶素对H2O2引起的Huh7细胞氧化应激的作用及其机制。方法:对H2O2和表儿茶素干预培养的Huh7细胞,应用MTT法检测细胞存活率,荧光探针DCFH-DA测定细胞内活性氧(ROS)生成量,免疫印迹测定丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt),增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA),磷酸化应激激活的c-Jun蛋白水平。结果:0.8mmol/LH2O2孵育1h可诱导显著Huh7细胞损伤,细胞存活率下降到(40±3.2)%,ROS生成量比未处理细胞多5.4倍。细胞经150μmol/L表儿茶素与H2O2共孵育后,细胞存活率提高到(94.5±9.84)%;表儿茶素能显著抑制H2O2引起的Huh7细胞ROS生成,ROS生成下降60%(P〈0.01)。表儿茶素抑制H2O2引起Huh7细胞死亡和ROS生成随剂量增加抑制作用加强。表儿茶素抑制H2O2激发Huh7细胞磷酸化c-Jun表达,提高细胞Akt、PCNA水平。结论:表儿茶素抑制H2O2引起的Huh7细胞氧化应激损伤而导致的细胞死亡,其作用机制是通过减少细胞内活性氧生成,抑制H2O2激活磷酸化c-Jun,提高细胞Akt,PCNA水平。
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