作者:施圆圆; 何士刚; 李书华视网膜神经节细胞离体电转染体外培养
摘要:目的:通过离体电转染将GFP对胚胎期小鼠视网膜神经节细胞(RGC)进行标记来观察其形态.方法:剥离胚胎小鼠E14的视网膜连同晶状体,放入定制的电转杯中进行电转染,以8~16V电压将pCAGGS—EGFP质粒导入RGC,体外培养视网膜1~5d,观察绿色荧光蛋白GFP的表达情况。结果:以12V,50ms,950InS的间隔,5个脉冲转染效率最高,为81.25%:20~144h期间GFP依次由胞体向轴突、树突扩散分布。结论:在体外培养基中培养1~5d.pCAGGS—EGFP经过最适电压转染后能够在小鼠视网膜神经节细胞中持续扩散表达.
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