作者：邹东霆; 李冰gfp转染细胞周期淬灭乙醇多聚甲醛
摘要：目的：以绿色荧光蛋白（GFP）作为报道基因，探讨转染GFP的培养细胞检测细胞周期的流式细胞技术。方法：用贴壁细胞MCF-7细胞以脂质体转染PEGFP—C，，转染后24h收集细胞，分别用70％乙醇固定、1％多聚甲醛固定和1％多聚甲醛固定后用透膜齐3透膜PI染色，以非转染细胞作为阴性对照，转染CFP非固定细胞作为阳性对照，用流式细胞仪检测。结果：用70％乙醇固定细胞导致GFP完全淬灭；用1％多聚甲醛固定保持99％的GFP阳性率，荧光强度稍有下降；而经过皂素破膜和PI染色后，GFP的阳性率也能保持有原来的80％左右；1％多聚甲醛固定24h内对GFP的阳性率没有大的影响。结论：对于含有GFP基因的细胞在进行流式细胞周期的检测时，应避免使用细胞周期常规的乙醇固定方法；l％多聚甲醛固定加皂素破膜能有效保证GFP的荧光活性。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
