作者:林晓圳; 董颀; 石永英; 张弋; 陈敏生神经肽y心肌细胞动物实验大鼠
摘要:目的:探讨钙离子/钙调蛋白(Ca^2+/CaM)依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路在神经肽Y(NPY)诱导下心肌细胞肥大的作用。方法:原代培养SD乳鼠心肌细胞,将细胞分为5组,NPY组:培养液中加入终浓度为100nmol/L的NPY:KN-931组、KN-935组和KN-9310组除加入100nmol/L的NPY外,分别加入CaMKⅡ特异性抑制剂KN-93,终浓度为1μmol/L、5μmol/L和10μmol/L;对照组:培养液中不加任何刺激药品。加药24h后采用 ^3H-亮氨酸(Leu)掺入法测定各组心肌细胞蛋白质合成速率,Western blotting测定对照组与NPY组心肌细胞的CaMKⅡδ蛋白表达。结果:经100nmol/L NPY刺激24h后,可明显增加心肌细胞^3H-Leu掺入量(p〈0.05),KN-93(1-10μmol/L)可以抑制NPY刺激的心肌细胞^3H-Leu掺入量的增加,并呈剂量依赖性(P均〈0.05);100nmol/L NPY明显增加心肌细胞内CaMKⅡδ蛋白的表达(P〈(0.05)。结论:Ca^2+/CaM依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号途径参与NPY诱导的大鼠心肌细胞肥大反应。
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