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人gp130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因克隆及真核表达载体的构建

作者:黄娟; 李博文; 梁艳芳; 陈莎莎; 杨维青; ...gp130真核表达载体融合基因

摘要:目的克隆含人gp130和IL-12Rβ2胞外段的基因并构建人gp130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因真核表达载体。方法设计合成特异性引物,以人外周血单个核细胞(PBMC)cDNA为模板,PCR法扩增gp130胞外段基因和IL-12Rβ2胞外段基因;应用T-A克隆技术和亚克隆技术,构建骨架为GV140的人gp130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因真核表达载体。结果 PCR扩增得到人gp130胞外段基因,IL-12Rβ2胞外段基因和gp130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因片段,克隆得到重组体GV140-gp130-IL-12Rβ2,测序验证了重组体的准确性。结论成功构建了人gp130-IL-12Rβ2胞外段融合蛋白基因真核表达载体。

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