作者:Huang; X; Xuan; X; Hirata; H; 陈兴智(...重组sag2抗原快速免疫层析试验检测方法猫动物实验刚地弓形虫弓形虫抗体
摘要:血清学试验是目前检测弓形虫感染的重要方法,既往曾在实验中证明以在大肠杆菌或昆虫细胞中表达的弓形虫表面抗原2(SAG2)用于酶联免疫吸附试验(ELISA)具有高度敏感性和特异性,但ELISA受实验条件和时间的限制并需要专门的技术和设备。日本带广畜产大学国立原虫学研究中心尝试以重组SAG2抗原快速免疫层析试验(ICT)检测猫体内刚地弓形虫抗体,取得了良好效果。通常ICT需要较高浓度和纯度的抗原,为提高抗原的表达量,将刚地弓形虫RH株速殖子中编码SAG2的一438bp的截短型基因片段作为模板,以一对特定的寡核苷酸引物进行PCR扩增,将扩增产物插入到pGEX-4T-3质粒EcoRⅠ位点,分别进行GST-SAG2的融合表达(G—rSAG2t)和rSAG2t的单独表达,并将表达温度从37℃调整到25℃以提高产量。
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