作者：唐春舟 管怀进龟分枝杆菌龟亚种人角膜上皮细胞炎性细胞因子脂阿拉伯甘露聚糖脂甘露聚糖
摘要：目的：研究龟分枝杆菌细菌壁内脂葡聚糖对人角膜上皮细胞IL-6和IL-8表达的影响及其可能信号转导通路。方法：提取龟分枝杆菌细菌壁内脂葡聚糖作用于原代培养人角膜上皮细胞（human corneal epithelia,HCE）。实验分为实验组（脂葡聚糖样品处理组）、阳性对照组（LPS处理组）和空白组。脂葡聚糖处理后的0,6,12h各时间点采用RT-PCR法在mRNA水平检测实验组中IL-6和IL-8的表达水平;脂葡聚糖处理后的0,6,12,24h各时间点采用ELISA法在蛋白水平检测实验组、阳性对照组和空白组中IL-6和IL-8的表达。免疫细胞化学法检测空白组与实验组（时间点24h）HCE细胞内NF-kB的表达与定位。结果：实验组中,12h内IL-6和IL-8在mRNA水平明显增加,6h时即达到峰值（IL-6是空白组的32.7倍,IL-8是对照组的36.8倍）;在蛋白质水平,培养上清内IL-6和IL-8含量在24h内呈现时间依赖性上升（6,12,24h各时间点与对照组之间均有统计学差异,P〈0.05）,与阳性对照组变化一致。空白组NF-kB定位于细胞浆内,实验组NF-kB被激活,移位至细胞核内。结论：龟分枝杆菌来源的脂葡聚糖可以促使人角膜上皮细胞过表达IL-6和IL-8,其信号转导通路可能是通过核转录因子NF-KB进行的。
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