作者：刘珊珊; 陈香梅; 李蒙; 李钰酵母双杂交系统细胞凋亡
摘要：目的 研究BI-1完整编码区能否在酵母细胞中表达，排除自身激活作用，并验证它能否用于酵母双杂交系统。方法 以人正常肺组织cDNA为模板，扩增BI-1完整编码区，经EcoR I、Sal I双酶切后克隆到酵母双杂交系统诱饵载体pGBKT7上，构建诱饵蛋白载体pGBKT7．BI-1，转化酵母细胞，通过β-半乳糖苷酶活性分析验证有无自激活，Western印迹验证其表达。结果 DNA测序显示BI-1编码区内无突变，β-半乳糖苷酶活性分析显示转入pGBKT7。BI-1和阴性对照的酵母菌落没有激活报告基因LacZ，而阳性对照菌落呈现蓝色。结论 含有BI-1完整编码区的诱饵载体不存在自身激活作用，并能在酵母细胞中表达BI-1蛋白，能够应用于酵母双杂交系统筛选相互作用蛋白。
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